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一、食品微生物檢測實驗室的分區和功能
按照CNAS-CL09:2013《檢測和校準實驗室能力認可準則在微生物檢測領域的應用說明》“5.3設施和環境條件”規定,微生物實驗室的建設、總體布局和設施應能滿足從事檢驗工作的需要,并以能獲得可靠的檢測結果為重要依據,且符合所開展微生物檢測活動生物安全等級的要求。根據以上原則以及檢測工作的需要,檢測設施主要包括準備間、高溫間、潔凈間、培養間、可疑致病菌的鑒定區、污染物處理區以及洗刷間。 此外,根據實際需要還應配備樣品儲存區、標準菌株的儲藏間以及倉庫。
1.準備間:功能上應涵蓋培養基的稱量、制備和保存,天平間、制水間可包含在此區域中;根據功能和面積大小,可再對準備間進行合理劃分。
2.高溫間。培養基的濕熱滅菌、玻璃器皿的干熱滅菌等;此區域應單獨,**有排風設施。
3.潔凈間:樣品檢測應在潔凈區域進行,所有樣品的前處理均在此區域操作。
4.培養間:食品微生物檢測需要的培養溫度較多,需要專門區域放置培養箱;建議培養所需的水浴鍋也放置于此。霉菌的培養應與細菌的培養分開(從事保健食品注冊檢驗的機構需有專門的霉菌實驗室)。
5.污染物處理區:經過處理的樣品、中間培養物以及可疑菌鑒定接觸到的多種廢棄物均要經過無害化處理。
6.洗刷間:經過無害化處理的玻璃器皿在此區域內進行洗刷,烘干和放置。
除了以上功能區,食品微生物檢測實驗室還應有試劑耗材儲存庫,儲存流轉量較大的玻璃器皿、防護裝備以及試劑耗材和培養基等樣品儲存區,需要放置已檢和未檢樣品。 此外,實驗室還需要空間放置中間培養物以及標準菌株。
二、實驗室平面布局
過于繁復的平面布局,只能增加使用中的不便,并不能真正起多少實際作用;一些實際工程由于平面布局不合理,不僅影響實驗室的有效使用面積,還增加了初投資和管理難度。 因此,一個完善合理的布局非常重要。
實驗室布局設計應遵循“單向流”原則,減少和避免潛在的污染和生物危害。微生物實驗室應設計成單獨區域,按照各個功能區的分布和單向流原則根據場地進行設計。 根據“《檢驗檢測實驗室設計、建設的技術要求食品檢測實驗室》征求意見稿”,食品微生物檢測實驗室典型布局參見圖1。

圖1中,包含了主要的檢測設施。 從布局上說,準備間放在中間,與潔凈室、培養室、鑒定室及高壓滅菌室均相鄰,工作流程便利、順暢;樣品先進入潔凈室,然后依次是培養間、鑒定室,***是廢棄物的處理,基本滿足“單向流”原則。但是從實驗室的功能上來說,樣品的前處理需要在潔凈區完成,然而圖1在此處放置了一臺生物安全柜。
其不是用來進行病原微生物的分離鑒定的;一方面存在使樣品污染的可能性,另一方面鑒定室的建立失去了意義。但若是出于處理低污染樣品時防止污染室內空氣考慮的話,低污染樣品的概念很難定義。此外,進行食品病原微生物的分離鑒定工作應在二級生物安全實驗室進行,此處的鑒定室應理解為BSL2,生物安全柜應放置在此區域中,高壓滅菌室可進一步分為污物高壓和非污物高壓;調整后的布局圖見圖2。

此外,檢測人員的辦公區或休息區應與實驗區分開,但不應相距過遠。各個機構在建立食品微生物檢測實驗室時,可將樣品存放間、霉菌實驗室、標準菌株存放及倉庫等輔助設施根據場地大小合理添加布局。
三、關鍵區域和注意事項
1.關鍵區域
樣品檢測應在潔凈區域進行,超凈工作臺和潔凈室均可以滿足要求。超凈工作臺空間有限,適用于樣品量少,操作簡單的樣品,但在實際檢測中,考慮到工作效率,潔凈室才是進行微生物檢測前處理的*關鍵場所,可有效防止樣品的二次污染。
2.注意事項
潔凈室在食品微生物檢測中起著至關重要的作用,在進行建設時,有以下幾點需要格外關注:
(1)潔凈度要求:我國目前尚無食品微生物潔凈室設計規范,對潔凈室的潔凈度無明確要求。在2014年國家標準委發布的《檢驗檢測實驗室設計、建設的技術要求食品檢測實驗室》征求意見稿中,也未做具體要求;一般來說,在10000級的潔凈室中進行食品微生物檢測可以達到要求。根據GB 50073《潔凈廠房設計規范》的規定,潔凈度等級可選擇兩種控制粒徑,對于生物安全實驗室,應選擇0.5μm和5μm作為控制粒徑;對于二級生物安全實驗室,對潔凈度并未作要求,但為保護實驗環境,延長生物安全柜的使用壽命,建議采用機械通風,并加裝過濾裝置,并保持一定的負壓(不小于-5Pa)。此外根據使用的頻率、樣品的潔凈度以及日常監控結果,定期安排有資質的機構對潔凈室的各項技術參數進行檢測,一般檢測時間*長間隔為12個月,但浮游菌和沉降菌一般為6個月。
(2)消毒滅菌系統:在實驗室建造時,除了考慮裝飾材料的耐腐性以及控溫控濕系統滋生細菌的問題外,日常的消毒滅菌也需要考慮,潔凈室常用的滅菌方式有紫外線燈滅菌和氣體滅菌。紫外線燈滅菌為表面滅菌,對內部和背陰面不起作用,波長為253.7nm的紫外線滅菌效果**,但需要定期檢測紫外燈的照度,此外燈管開關應安裝在門外;若考慮對整個潔凈間進行徹底滅菌,可采用氣體熏蒸,如臭氧熏蒸、過氧乙酸熏蒸等方法,但要注意在人員進入前進行有效通風。
四、總結
微生物實驗室的合理布局、潔凈室環境的控制是微生物檢測的基礎和保障。除了硬件條件,食品微生物檢測從采樣、樣品前處理、培養、轉接到鑒定,是時間跨度長而又連續的過程,這就要求實驗人員要嚴格遵循每一個環節的操作規程,保證檢測結果客觀性與真實性。
